Resumo As bactérias foram isoladas de amostras de suco de maçã fresco de lojas de três diferentes localidades de Lahore. A análise de amostras dos mercados Liberty, Anarkali e Yateem khana mostram diferentes níveis de contaminação. Havia bactérias patogênicas e não patogênicas em todas as amostras e foram identificadas pelos testes morfológicos e bioquímicos. A maioria dos plasmídeos de bactérias patogênicas tinha 4 kb em seu tamanho molecular. A ribotipagem do sequenciamento do gene do RNA ribossômico 16S foi realizada para confirmar a cepa de Helicobacter pylori e Gluconobacter oxydans. A maior sensibilidade de 210 mm foi mostrada por Enterobacter sp. contra disco de azteromisina (15µg) enquanto Micrococcus sp. foi altamente resistente a todos os antibióticos aplicados. A resistência a antibióticos de bactérias patogênicas também foi verificada contra extratos de plantas de Ricinus communis, todos os patógenos bacterianos isolados foram resistentes, mas apenas E. coli foi inibida em 300µl dos extratos. A presença de bactérias patogênicas nas amostras de suco de maçã deveu-se à contaminação da água de esgoto na água potável, enquanto algumas dessas bactérias patogênicas vieram da árvore da maçã e outras de armazéns de frutas.

Abstract Bacteria were isolated from samples of Fresh Apple juices from shops of three different localities of Lahore. Analysis of samples from Liberty, Anarkali and Yateem khana Markets show different levels of contamination. There were pathogenic and non-pathogenic bacteria in all samples and were identified by the morphological and biochemical tests. Most of the plasmids of pathogenic bacteria were 4kb in their molecular size. Ribotyping of 16S ribosomal RNA gene sequencing was done to confirm Helicobacter pylori strain and Gluconobacter oxydans. The highest sensitivity of 210mm was shown by Enterobacter sp. against Aztheromysine disk (15µg) while Micrococcus sp. was highly resistant against all of the Antibiotics applied. The antibiotic resistance of pathogenic bacteria was also checked against Ricinus communis plant's extracts, all isolated bacterial pathogens were resistant but only, E.coli was inhibited at 300µl of the extracts. Presence of pathogenic bacteria in Apple juice samples was due to contamination of sewage water in drinking water while some of these pathogenic bacteria came from Apple's tree and other from store houses of fruits.

Resumo Diabetes mellitus (DM) é uma síndrome endócrina caracterizada por níveis elevados de glicose no sangue devido à atividade anulada da insulina. Os tratamentos existentes para o DM têm efeitos colaterais e vários graus de eficácia. Portanto, é fundamental que novas abordagens sejam desenvolvidas para aprimorar o manejo do DM. As plantas terapêuticas foram acreditadas como tendo eficácia comparativamente alta com menos efeitos adversos. O presente estudo visa elucidar o perfil fitoquímico, efeitos anti-hiperlipidêmicos e antidiabéticos do extrato metanólico de D. salicifolia (folhas) em camundongos diabéticos induzidos por aloxana. Alloxan foi injetado por via intraperitoneal (150 mg kg-1, b.w), para induzir diabetes em camundongos. Os camundongos foram divididos em três grupos (n = 10). Grupo 1 (controle normal) recebeu ração normal e água purificada, Grupo II (controle diabético) recebeu ração regular e água limpa, e o grupo III (tratamento diabético) recebeu extrato metanólico da planta (300 mg kg-1) por 28 dias com uma dieta típica e água limpa durante todo o experimento. Amostras de sangue foram coletadas para verificar a glicose sérica e a concentração de LDL, TC, TG. O extrato demonstrou atividade anti-hiperglicêmica significativa (P <0,05), enquanto melhorias no peso corporal e no perfil lipídico dos camundongos foram observadas após o tratamento com o extrato. Este estudo estabelece que o extrato tem alta eficácia com comparativamente menos toxicidade e pode ser usado para o controle do DM.

Abstract Diabetes mellitus (DM), an endocrine syndrome characterized by high blood glucose levels due to abrogated insulin activity. The existing treatments for DM have side effects and varying degrees of efficacy. Therefore, it is paramount that novel approaches be developed to enhance the management of DM. Therapeutic plants have been accredited as having comparatively high efficacy with fewer adverse effects. The current study aims to elucidate the phytochemical profile, anti-hyperlipidemic, and anti-diabetic effects of methanolic extract D. salicifolia (leaves) in Alloxan-induced diabetic mice. Alloxan was injected intraperitoneally (150 mg kg-1, b.w), to induced diabetes in mice. The mice were divided into three groups (n=10). Group 1 (normal control) received normal food and purified water, Group II (diabetic control) received regular feed and clean water and group III (diabetic treated) received a methanolic extract of the plant (300 mg kg-1) for 28 days with a typical diet and clean water throughout the experiment. Blood samples were collected to checked serum glucose and concentration of LDL, TC, TG. The extract demonstrated significant antihyperglycemic activity (P<0.05), whereas improvements in mice's body weight and lipid profiles were observed after treatment with the extract. This study establishes that the extract has high efficacy with comparatively less toxicity that can be used for DM management.

Resumo A abordagem de avaliação do ciclo de vida foi realizada para um conjunto de móveis de madeira convencional produzido na divisão Mardan da província de Khyber Pakhtunkhwa do Paquistão durante 2018-19. Os dados primários sobre entradas e saídas foram coletados por meio de pesquisas por questionário de 100 fabricantes de conjuntos de móveis de madeira convencionais, 50 no distrito de Mardan e 50 no distrito de Swabi. No presente estudo, a abordagem de avaliação do ciclo de vida do berço ao portão foi aplicada para uma unidade funcional de um conjunto de móveis de madeira convencional. Os dados da média ponderada da produção foram modelados no software de modelagem de impactos ambientais, isto é, SimaPro v.8.5. Os resultados mostraram que os têxteis usados no conjunto de sofás, o preservativo de madeira para polir e prevenir o ataque de insetos e a gasolina usada no gerador tiveram a maior contribuição em todas as categorias de impacto ambiental avaliadas. A demanda total acumulada de energia para o conjunto de móveis de madeira fabricado foi de 30.005 MJ, com a maior parte da energia adquirida de recursos de combustíveis fósseis não renováveis.

Abstract Life cycle assessment was carried out for a conventional wooden furniture set produced in Mardan division of the Khyber Pakhtunkhwa province of Pakistan during 2018-19. Primary data regarding inputs and outputs were collected through questionnaire surveys from 100 conventional wooden furniture set manufacturers, 50 in district Mardan and 50 in district Swabi. In the present study, cradle-to-gate life cycle assessment approach was applied for a functional unit of one conventional wooden furniture set. Production weighted average data were modelled in the environmental impacts modelling software i.e., SimaPro v.8.5. The results showed that textile used in sofa set, wood preservative for polishing and preventing insects attack and petrol used in generator had the highest contribution to all the environmental impact categories evaluated. Total cumulative energy demand for wooden furniture set manufactured was 30,005 MJ with most of the energy acquired from non-renewable fossil fuel resources.

Resumo Bemisia tabaci é um complexo de espécies que causa danos a uma ampla gama de hospedeiros vegetais por meio de alimentação séria. Ele transmite vírus de plantas de diferentes grupos para importantes safras agrícolas. Algumas safras comerciais importantes do Paquistão são cana-de-açúcar, arroz, tabaco e óleo de semente. Apresenta alta variabilidade genética e é diferenciado em raças ou biótipos. Os biótipos são: biótipo Q, biótipo B, biótipo B2, biótipo M, biótipo L, biótipo A, biótipo H, biótipo C, biótipo K, biótipo N, biótipo R, biótipo E, biótipo P, biótipo J, biótipo S, biótipo AN . Embora o relatório atual baseado no estudo bayesiano das sequências de DNA do gene 1 da oxidase do citocromo mitocondrial (CO1) tenha classificado as diferentes populações de moscas-brancas em doze grupos genéticos, que são Mediterrâneo, África Subsaariana com folha de prata, Oceano Índico, Ásia II, Ásia I, Austrália, Novo Mundo, Itália, China, África Subsaariana sem folha prateada, Batata-doce Mediterrâneo / Ásia Menor / África e Uganda. Os begomovírus são o maior grupo de vírus transmitidos por B. tabaci e causam as principais doenças de culturas, como a doença do cacho do tomate e da pimenta-malagueta, doença do mosaico da mandioca, doença do mosaico amarelo de leguminosas e doença do enrolamento da folha do algodão. O principal objetivo do presente estudo é inculpar conhecimento sobre a diversidade genética da mosca-branca em campos de algodão em todo o Paquistão por meio da análise da sequência parcial de DNA do gene mitocondrial Citocromo Oxidase I (mtCO1).

Abstract Bemisia tabaci is a species complex that causes damage to its broad range of plant hosts through serious feeding. It transmits plant viruses of different groups to important agricultural crops. Some important cash crops of Pakistan are sugar cane, rice, tobacco and seed oil. It shows high genetic variability and is differentiated as races or biotypes. Biotypes are, biotype Q, biotype B, biotype B2, biotype M, biotype L, biotype A, biotype H, biotype C, biotype K, biotype N, biotype R, biotype E, biotype P, biotype J, biotype S, biotype AN. Although the current report based on the Bayesian study of mitochondrial cytohrome oxidase gene1 (CO1) DNA sequences has classified the different populations of whiteflies into twelve genetic groups which are Mediterranean, Sub-Saharan Africa silverleafing, Indian Ocean, Asia II, Asia I, Australia, New World, Italy, China, Sub-Saharan Africa non-silverleafing, Mediterranean/Asia Minor/Africa and Uganda sweet potato. Begomoviruses is largest group of viruses transmitted by B. tabaci and cause major diseases of crops such as tomato and chili leaf curl disease, cassava mosaic disease; yellow mosaic disease of legumes and cotton leaf curl disease. The main objective of current study is to inculpate knowledge regarding genetic diversity of whitefly in cotton fields across Pakistan via analysis of partial DNA sequence of mitochondrial gene Cytochrom Oxidase I (mtCO1).

Resumo Magnolia biondii Pamp é uma importante espécie de árvore ornamental muito cultivada e utilizada como porta-enxerto na propagação de diferentes variedades de Magnolia. Nos estudos atuais, hormônios anatômicos, fisiológicos e endógenos foram estudados para verificar o efeito do AIB na dose de 750 mg / L no enraizamento adventício e fornecer suporte teórico e técnico para a propagação de M. biondii Pamp por meio de estacas. Duas mil estacas foram preparadas e divididas em dois grupos, ou seja, tratadas com AIB e controle de água. Para a avaliação das atividades das enzimas antioxidantes e dos níveis de hormônios endógenos, as amostras foram coletadas no dia do plantio e a cada 5 dias, enquanto as demais etapas foram realizadas em laboratório de acordo com os protocolos e os devidos cuidados. Para as observações anatômicas, as amostras foram coletadas no 13º, 15º e 17º dias para estacas tratadas com AIB e no 21º, 23º e 25º dias para o controle. As amostras coletadas foram preservadas em solução FAA, e outras observações foram realizadas em laboratório. Observações anatômicas mostraram a necessidade de 13 dias para a diferenciação dos primórdios radiculares até o aparecimento de raízes adventícias jovens em estacas tratadas com AIB e de 21 dias para o desenvolvimento dos primórdios no controle. As atividades das enzimas antioxidantes envolvidas nas ROS foram significativamente maiores nas estacas tratadas com AIB em comparação com o controle. A POD apresentou pico no 13º dia antes da emergência das raízes nas estacas tratadas com AIB, enquanto no 21º dia apresentou pico no controle. A PPO teve pico no 21º dia nas estacas tratadas com AIB e no 29º dia no controle. A SOD apresentou pico no 17º dia nas estacas tratadas com AIB e no 25º dia no controle. A aplicação exógena de AIB aumentou os níveis endógenos de IAA e GA3 em relação ao controle, enquanto reduziu os níveis de ABA continuamente no momento do enraizamento e, em seguida, aumentou gradativamente. Inclusive, nosso estudo sugere que o AIB na dose de 750 mg / L é eficiente para o enraizamento de estacas de M. biondii Pamp, visto que potencializou o processo de atividades de enzimas antioxidantes e os níveis de hormônios endógenos, além de reduzir o tempo de formação de raízes, o que fica evidente nas observações anatômicas.

Abstract Magnolia biondii Pamp is an important ornamental tree species widely grown and used as a rootstock in the propagation of different Magnolia varieties. In the current studies, anatomical, physiological and endogenous hormones were studied to check the effect of IBA 750 mg/L on the adventitious rooting and to provide theoretical and technical support for the propagation of Magnolia biondii Pamp through stem cuttings. Two thousand stem cuttings were prepared and divided into two groups i.e., IBA treated cuttings and water control. For the evaluation of antioxidant enzyme activities, and endogenous hormones levels, samples were collected on the day of planting and each 5th day and further steps were carried out in the laboratory according to the protocols and proper precautions. For the anatomical observations, samples were collected on the 13th, 15th, and 17th day for IBA treated cuttings while 21st, 23rd, and 25th day for control. Collected samples were preserved in the FAA solution and further observations were carried out in the laboratory. Anatomical observations showed that it took 13 days for the differentiation of root primordia to the appearance of young adventitious roots in IBA treated cuttings, while it took 21 days to develop primordia in the control. Antioxidant enzyme activities involved in ROS were significantly higher in the IBA treated cuttings compared to control. POD showed a peak on the 13th day before the emergence of roots in IBA treated cuttings while it showed a peak on the 21st day in the control. PPO showed a peak on the 21st day in the IBA treated cuttings while it showed a peak on the 29th day in the control. SOD showed a peak on the 17th day in IBA treated cuttings, while it showed a peak on the 25th day in the control. Exogenous application of IBA enhanced the endogenous IAA and GA3 levels compared to CK, while it reduced the levels of ABA continuously at the time of rooting and then increased gradually. Inclusively, our study suggests that IBA 750 mg/L is efficient for the rooting of Magnolia biondii Pamp cuttings, as it enhanced the process of antioxidant enzyme activities, endogenous hormones levels and reduced the time of root formation which is evident from the anatomical observations.

Resumo As montanhas de Liupan são uma região importante na China no contexto de cobertura florestal e vegetação devido às enormes práticas de florestamento e plantação, que trouxeram mudanças nas propriedades físico-químicas do solo, e estoques e estequiometrias do solo raramente são compreendidos. O estudo visa explorar a distribuição de nutrientes do solo a 1 m de profundidade do solo na região da floresta plantada. As amostras de solo em cinco incrementos de profundidade (0-20, 20-40, 40-60, 60-80 e 80-100 cm) foram coletadas e analisadas para diferentes características físico-químicas do solo. Os resultados mostraram uma variação significativa nos valores de densidade do solo (BD), porosidade do solo, pH, capacidade de troca catiônica (CEC) e condutividade elétrica (CE). Mais DB do solo (1,41 g cm-3) e pH (6,97) do solo foram observados na camada profunda do solo (80-100 cm), enquanto os maiores valores de porosidade (60,6%), CE (0,09 mS cm-1) e CEC (32,9 c mol kg-1) foram refletidos na camada superior do solo (0-20 cm). Da mesma forma, os maiores teores de carbono orgânico do solo (SOC), fósforo total (TP), fósforo disponível (AP), nitrogênio total (TN) e potássio disponível (AK) foram calculados na camada superficial do solo (0-20 cm). Com o aumento do incremento da profundidade do solo, uma tendência decrescente no SOC e na concentração de outros nutrientes foi encontrada, enquanto o potássio total do solo (TK) produziu uma correlação negativa com a profundidade da camada do solo. Todos os resultados produziram a distribuição de SOCs e TNs (estoques) em várias profundidades de solo em padrões de floresta 0 → 20cm> 20 → 40cm> 40 → 60cm ≥ 60 → 80cm ≥ 80 → 100 cm. Além disso, as relações estequiométricas de C, N e P, as relações C / P e N / P, apresentaram valores máximos (66,49 e 5,46) em 0-20 cm, e valores mais baixos (23,78 e 1,91) em solo de 80-100 cm profundidade da camada. Embora a relação C / N fosse estatisticamente semelhante em todo o perfil do solo (0-100 cm). Esses resultados destacaram que os incrementos de profundidade do solo podem ser amplamente atribuídos a flutuações nas propriedades físico-químicas do solo, estoques e estequiometrias do solo. Mais estudos são necessários para tirar conclusões adicionais sobre a dinâmica dos nutrientes, estoques de solo e estequiometria do solo nessas florestas.

Abstract Liupan Mountains are an important region in China in the context of forest cover and vegetation due to huge afforestation and plantation practices, which brought changes in soil physio-chemical properties, soil stocks, and soil stoichiometries are rarely been understood. The study aims to explore the distribution of soil nutrients at 1-m soil depth in the plantation forest region. The soil samples at five depth increments (0-20, 20-40, 40-60, 60-80, and 80-100 cm) were collected and analyzed for different soil physio-chemical characteristics. The results showed a significant variation in soil bulk density (BD), soil porosity, pH, cation exchange capacity (CEC), and electric conductivity (EC) values. More soil BD (1.41 g cm-3) and pH (6.97) were noticed in the deep soil layer (80-100 cm), while the highest values of porosity (60.6%), EC (0.09 mS cm-1), and CEC (32.9 c mol kg-1) were reflected in the uppermost soil layer (0-20 cm). Similarly, the highest contents of soil organic carbon (SOC), total phosphorus (TP), available phosphorus (AP), total nitrogen (TN), and available potassium (AK) were calculated in the surface soil layer (0-20 cm). With increasing soil depth increment a decreasing trend in the SOC and other nutrient concentration were found, whereas the soil total potassium (TK) produced a negative correlation with soil layer depth. The entire results produced the distribution of SOCs and TNs (stocks) at various soil depths in forestland patterns were 0→20cm > 20→40cm > 40→60cm ≥ 60→80cm ≥ 80→100 cm. Furthermore, the stoichiometric ratios of C, N, and P, the C/P, and N/P ratios showed maximum values (66.49 and 5.46) in 0-20 cm and lowest values (23.78 and 1.91) in 80-100 cm soil layer depth. Though the C/N ratio was statistically similar across the whole soil profile (0-100 cm). These results highlighted that the soil depth increments might largely be attributed to fluctuations in soil physio-chemical properties, soil stocks, and soil stoichiometries. Further study is needed to draw more conclusions on nutrient dynamics, soil stocks, and soil stoichiometry in these forests.

Resumo O estudo transversal atual foi realizado entre setembro de 2019 e janeiro de 2020 no Departamento de Patologia Mardan Medical Complex (MMC), Mardan, e no District Headquarter Hospital North Waziristan, Khyber Pakhtunkhwa (KP), Paquistão. Os objetivos do presente estudo foram determinar a prevalência da leishmaniose e seus fatores de risco associados em distritos selecionados da província de KP, Paquistão. Ao todo, 374 (n = 374) pacientes com leishmaniose foram incluídos no presente estudo. Amostras de pele da borda da úlcera foram coletadas. As lâminas foram coradas pelo corante Giemsa e examinadas quanto à presença de amastigotas. As prevalências de pacientes infectados por leishmania em diferentes regiões de KP foram as seguintes: região do Waziristão Norte 53,7 (n = 201), distrito Mardan 34,7% (n = 130); distrito Nowshera 6,7% (n = 25), distrito Swabi 1,1% (n = 4) e outros distritos, ou seja, Dir, Malakand, Buner e Bajawarr foram 3,7% (n = 14). A frequência de leishmaniose foi maior no sexo masculino e a maioria dos pacientes infectados estava na faixa etária < 10 anos. Entre n = 374 pacientes, 95,7% (n = 358) tinham leishmaniose cutânea enquanto 3% (n = 11) tinham infecção do tipo mucocutâneo e 1,3% (n = 5) pacientes tinham infecção cutânea e mucocutânea. Após tratamento com estibogluconato de sódio (SSG), 97% (n = 362) apresentaram sinais clínicos de recuperação completa ou parcial de suas lesões cutâneas. Conclusivamente, a maior incidência de infecção por leishmania ocorreu durante o curto período de estudo e a maioria dos casos apresentou resposta positiva ao tratamento.

Abstract Current cross-sectional study was carried out between September 2019 to January 2020 at the Department of Pathology, Mardan Medical Complex (MMC), Mardan, and District Headquarter Hospital North Waziristan, Khyber Pakhtunkhwa (KP), Pakistan. The objectives of the current study were to determine the prevalence of leishmaniasis and its associated risk factors in selected districts of KP province, Pakistan. Altogether, three hundred and seventy-four (n=374) leishmaniosis patients were included in the current study. Skin specimen from the ulcer border were collected. The slides were stained by Giemsa stain and examined for the presence of amastigote. The prevalence of leishmania infected patients in different region of KP were as follows: North Waziristan region 53.7 (n=201) District Mardan 34.7% (n=130); District Nowshera 6.7% (n=25), District Swabi 1.1% (n=4) and other Districts i.e. Dir, Malakand, Buner and Bajawarr were 3.7% (n=14). The frequency of leishmaniasis were more in male and majority of the infected patients were in the age group of <10 years. Among n=374 patients 95.7% (n= 358) had cutaneous leishmaniasis while 3% (n= 11) had mucocutaneous type of infection and 1.3% (n= 5) patients had both cutaneous and mucocutaneous infection. Upon treatment by Sodium stibogluconate (SSG) 97% (n=362) showed clinical signs of complete or partial recovery of their skin lesions. Conclusively, highest incidence of leishmania infection occurred during short study period and majority of the cases showed positive response to treatment.

Resumo O crescimento da população humana é um risco solene para a biodiversidade em nível global. A pressão antrópica maciça e a invasão nos habitats naturais iniciaram o conflito homem-vida selvagem nas áreas rurais. O presente estudo teve como objetivo avaliar o conflito entre humanos e animais selvagens no Parque Nacional Musk Deer (MDNP) de 2013 a 2018. Os resultados revelaram uma estimativa de 241.784 cabeças de gado nômades e 5.589 residenciais pastando em diferentes áreas do MDNP durante a temporada de verão. Um total de 126 cabeças foi depredado por carnívoros durante o período de estudo. A maioria (n = 39) das cabeças de gado foi morta em maio (n = 29). A depredação do gado resultou em perdas econômicas no valor de 3,115 milhões de PKRs (US$ 25.744) para a comunidade de pastores, enquanto os agricultores receberam 1,629 milhões de PKRs (US$ 13.466) perdas devido à invasão de plantações. A maioria (64%) dos entrevistados acredita que o conflito entre humanos e animais selvagens aumentou devido à escassez de alimentos ou presas nos habitats naturais dos carnívoros. A maioria (92%) dos entrevistados não gostou da presença de predadores no MDNP. Esquemas de compensação de perdas podem transformar essa atitude negativa em positiva e aumentar a tolerância com a presença de carnívoros em suas proximidades. Este estudo fornece uma visão sobre o conflito homem-vida selvagem no MDNP e abre caminho para a compreensão do conflito e conservação de espécies carnívoras na área de estudo.

Abstract Growing human population is a solemn risk to biodiversity at a global level. Massive anthropogenic pressure and invasion in the natural habitats initiated the human-wildlife conflict in rural areas. Present study aimed to assess human-wildlife conflict in Musk Deer National Park (MDNP) from 2013 to 2018. Results revealed an estimated 241784 nomadic and 5589 residential livestock heads grazed in different areas of MDNP during the summer season. A total of 126 heads were depredated by carnivores during the study period. Majority (n=39) of livestock heads were killed in May (n=29). Livestock depredation resulted in economic losses worth 3.115 million PKRs (25744 US$) to the herder community while farmers received 1.629 million PKRs (13466 US$) losses due to crop raiding. Most (64%) of the respondents believed human-wildlife conflict heightened due to scarcity of food or prey in the natural habitats of carnivores. Majority (92%) of the respondents did not like the presence of predators in MDNP. Loss compensation schemes could turn this negative attitude into the positive one and increase tolerance about the presence of carnivores in their vicinity. This study provides an insight into the human-wildlife conflict in MDNP and paves a way for understanding the conflict and conservation of carnivore species in the study area.

Resumo O protocolo de imersão floral mediado por Agrobacterium é o método de transformação mais amplamente utilizado para uma planta-modelo Arabidopsis thaliana. Existem vários métodos úteis para transformações de Arabidopsis mediados por Agrobacterium tumefaciens, mas são demorados e com baixa eficiência de transformação. Aqui, desenvolvemos uma linha transgênica de Arabidopsis TET12p::TET12-RFP em um curto período de tempo e eficiência de transformação aprimorada usando um método de transformação modificado por meio da aplicação de estresse hídrico após o mergulho floral. Neste protocolo, células de Agrobacterium transportando vetores recombinantes TET12p::TET12-RFP foram ressuspensas em uma solução de 5% de sacarose, 0,05% (v/v) silwet L-77 para transformar gametas femininos de inflorescências de Arabidopsis em desenvolvimento. Arabidopsis tratadas foram então aplicadas com diferentes níveis de estresse hídrico para estimular as plantas a utilizar o máximo de energia da planta no processo de maturação das sementes. Os estresses aplicados alcançaram a rápida maturação das inflorescências já tratadas enquanto paravam o crescimento de inflorescências não tratadas recém-surgidas, diminuindo, assim, as chances de coleta errada de sementes não transformadas. Consequentemente, as sementes coletadas eram principalmente transgênicas, com uma frequência de transformação de pelo menos 10%; portanto, a triagem para seleção dos transformantes positivos foi mais vantajosa em um meio seletivo em comparação com um método clássico de imersão floral. Dentro de 2-3 meses, 200 plantas transgênicas individuais foram produzidas a partir de apenas 10 plantas infiltradas. Este estudo conclui que a aplicação de estresse hídrico em um estágio específico da planta é uma estratégia benéfica para alcançar a Arabidopsis transgênica em um curto período de tempo com alta eficiência de transformação.

Abstract The Agrobacterium-mediated floral dip protocol is the most extensively used transformation method for a model plant Arabidopsis thaliana. Several useful methods for Agrobacterium tumefaciens–mediated transformations of Arabidopsis are existing, but they are time consuming and with low transformation efficiency. Here, we developed a transgenic Arabidopsis lines TET12p::TET12-RFP in a short period of time and enhanced transformation efficiency by using a modified transformation method by applying drought stress after floral dip. In this protocol, Agrobacterium cells carrying TET12p::TET12-RFP recombinant vectors were resuspended in a solution of 5% sucrose, 0.05% (v/v) silwet L-77 to transform female gametes of developing Arabidopsis inflorescences. Treated Arabidopsis were then applied with different levels of drought stresses to stimulate plants for the utilization of maximum plant energy in seed maturation process. The applied stresses achieved the fast maturation of already treated inflorescences while stopped the growing of newly arising untreated inflorescence, thus decreased the chances of wrong collection of untransformed seeds. Consequently, the collected seeds were mostly transgenic with a transformation frequency of at least 10%, thus the screening for positive transformants selection was more advantageous on a selective medium as compared to a classical floral dip method. Within 2-3 months, two hundred of individual transgenic plants were produced from just 10 infiltrated plants. This study concludes that application of drought stresses in a specific stage of plant is a beneficial strategy for achieving the transgenic Arabidopsis in a short period of time with high transformation efficiency.

Resumo O gás ozônio é considerado um agente antimicrobiano seguro em indústrias alimentícias. Aqui, avaliamos as atividades antifúngicas e antiaflatoxigênicas do ozônio contra a contaminação fúngica em nozes. Os gêneros fúngicos mais predominantes em nozes foram Aspergillus, Penicillium, Fusarium e Rhizopus. O ozônio (4 ppm) reduziu significativamente a esporulação fúngica de A. flavus e sua produção de aflatoxinas. Curiosamente, o tratamento de nozes com ozônio reduziu a contagem total de fungos e aumentou a degradação de aflatoxinas em aproximadamente 95% e 85%, respectivamente. O ozônio apresentou alta eficiência para aumentar a permeabilidade da membrana celular e a lesão da parede celular dos fungos. O aumento do tempo de exposição do ozônio em nozes em até 180 minutos levou à redução do total de lipídios, carboidratos e proteínas em 41,2%, 42,7% e 38,4%, respectivamente, em pistache, amêndoa e amendoim. Em conclusão, a ozonização é uma abordagem de descontaminação adequada para reduzir a carga microbiana em nozes, quando usada com tempo de exposição adequado.

Abstract Ozone gas is considered as a safe antimicrobial agent in food industries. Here, we evaluated the antifungal and antiaflatoxigenic activities of ozone against fungal contamination in nuts. The most predominant fungal genera in nuts were Aspergillus, Penicillium, Fusarium, and Rhizopus. Ozone (4 ppm) significantly reduced the fungal sporulation of A. flavus and their aflatoxin production. Interestingly, ozone treatment of nuts reduced the total fungal count and increased aflatoxins degradation by approximately 95% and 85%, respectively. Ozone displayed high efficiency to increase the permeability of cell membrane and injury of cell wall of fungi. Increasing the exposure time of ozone in nuts up to 180 minutes showed to reduce the total lipid, carbohydrates, and protein by around 41.2%, 42.7% and 38.4% respectively, in pistachio, almond and peanuts. In conclusion, ozonation is a suitable decontaminating approach for reducing the microbial load in nuts, when used with suitable exposure time.

Resumo O urso-negro-asiático está há muito tempo em conflito com os seres humanos. A invasão de plantações é uma das principais causas desse conflito frequentemente observado no sul da Ásia: cultivos invadidos por ursos-negros afetados por atributos temporais, espaciais e antropogênicos. A compreensão desse conflito, assim como sua mitigação, é vital para a conservação dessa espécie ameaçada. O presente estudo teve como objetivo avaliar a invasão de culturas por ursos-negros na região montanhosa de Azad Jammu e Caxemira. Pesquisas de campo foram realizadas para observar características espaciais e temporais de invasão de culturas, entre 2015 e 2020, e dados coletados usando questionários desenhados e adaptados aleatoriamente em aldeias próximas às florestas. Os resultados revelaram que o milho foi a única cultura atacada por ursos-negros. Uma área total de 28 acres foi invadida pelo urso-preto na temporada de outono (agosto-novembro), resultando em um dano de 51 toneladas – todo o ataque foi realizado à noite. Cada respondente recebeu danos na colheita em 0,09 acre, com uma perda de 0,17 tonelada de rendimento. A quantidade e a área da colheita foram significativamente correlacionadas entre si. O distrito de Neelum compartilhou 49% da perda total da colheita, enquanto 47% do milho foram invadidos na faixa altitudinal de 2100-2500 m. A invasão de culturas foi altamente significativa (χ2 = 1174,64;df = 308; p < 0,01), dependente da distância até a floresta. A regressão linear revelou que a quantidade de milho foi determinada por área, tempo e área total do campo. Os agricultores enfrentaram uma perda de 3,8 milhões de PKRs devido a danos nas colheitas causados por ursos-negros. Apesar do grande prejuízo, a maioria (23%) dos respondentes não respondeu ao questionamento sobre as medidas de mitigação, indicando má adaptação das medidas preventivas. A estratégia preferida para evitar danos às plantações foi fazer barulho (27,8%) quando os ursos atacaram suas plantações. Recomenda-se o início de um esquema de compensação para os agricultores, que transformará sua atitude negativa em positiva em relação à vida selvagem e ao urso-negro em particular. O estudo fornece uma nova visão do conflito entre humanos e ursos, particularmente no contexto espacial e temporal de invasões de colheitas em AJ&K.

Abstract Asiatic black bear has long been in conflict with human beings crop raiding is a major cause of this conflict frequently noted in South Asia. Crops raided by black bears affected by temporal, spatial and anthropogenic attributes. Insight in this conflict and its mitigation is vital for the conservation of this threatened species. Present study aimed to evaluate crop raiding by black bears in the mountainous region of Azad Jammu and Kashmir. Field surveys were carried out to observe spatial and temporal crop raiding features between 2015-2020 and data gathered using designed questionnaires randomly tailored in villages nearby the forests. Results revealed that maize was the sole crop raided by black bears. A total of 28-acre area was raided by black bear in the fall season (Aug-November) resulting in a damage of 51 metric tons, whole raiding was carried out at night. Each respondent received crop damage on 0.09 acre with a loss of 0.17 metric ton yield. Crop quantity and area were significantly correlated to each other. District Neelum shared 49% of the total crop loss, while 47% of the maize was raided at the altitudinal range of 2100-2500 m. crop raiding was highly significantly ( χ 2 = 1174.64 ; d f = 308 ; p < 0.01) dependent upon distance to the forest. Linear regression revealed that maize quantity was determined by area, time and the total field area. Farmers faced 3.8 million PKRs loss due to crop damage by black bears. Despite the huge loss, the majority (23%) of the respondents did not respond to the query on mitigation measures indicating a poor adaptation of preventive measures. Preferred strategy to avoid crop damage was making noise (27.8%) when bears attacked their crops. A start of compensation scheme to the farmers is recommended that will have turned their negative attitude into a positive one toward the wildlife and black bear particularly. Study provides a new insight in human-bear conflict, particularly in spatial and temporal context of crop raiding in AJ&K.

Resumo O presente estudo foi realizado em Hayat Abad Industrial Estate, localizado em Peshawar, para avaliar os níveis de cádmio (Cd) que estavam presentes no solo, bem como nas partes da planta (raízes e brotos). Para avaliar o potencial de fitorremediação das plantas foram determinados diferentes fatores, ou seja, Fator de Bioconcentração (BCF), Fator de Translocação (TF) e Coeficiente de Bioacumulação. Essas plantas foram cultivadas em seus habitats nativos (BAC). Analisamos a concentração de cádmio do solo coletada em 50 locais diferentes, variando de 11,54 mg/Kg (o mais baixo) a 89,80 mg/Kg (o mais alto). A concentração máxima (89,80 mg/Kg) de cádmio foi encontrada em HIE-ST-16L Marble City e HIE-ST-7 Bryon Pharma (88,51 mg/Kg) enquanto sua concentração mínima (12,47 mg/Kg) foi detectada no solo do local (HIE-ST-14L Royal PVC Pipe) e (11,54 mg/Kg) no local (HIE-ST-11 Aries Pharma). A maioria das espécies de plantas mostrou um enorme potencial para abordagens baseadas em plantas, como fitoextração e fitorremediação. Eles também mostraram o potencial de fitoestabilização. Com base na concentração de cádmio, as plantas mais eficientes para fitoextração foram Cnicus benedictus, Parthenium hysterophorus, Verbesina encelioides, Conyza canadensis, Xanthium strumarium, Chenopodium album, Amaranthus viridis, Chenopodiastrum murale, Prosopis juliflora, Convolvulus arvensis, Stellaria media, Arenaria serpyllifolia, Cerastium dichotomum, Chrozophora tinctoria, Mirabilis jalapa, Medicago polymorpha, Lathyrus aphaca, Dalbergia sissoo, Melilotus indicus e Anagallis arvensis. Os metais pesados de cádmio no solo examinado foram efetivamente removidos por essas espécies de plantas. Cerastium dichotomum e Chenopodium murale foram relatados como eficazes na fitoestabilização do Cd com base nas concentrações de metais selecionados nas raízes e nos valores de BCFs, TFs e BACs.

Abstract The present study was carried out in Hayat Abad Industrial Estate located in Peshawar to assess the levels of cadmium (Cd) that were present in the soil as well as the plant parts (Roots and shoots). To evaluate the phytoremediation potential of the plants different factors i.e. Bioconcentration Factor (BCF), Translocation Factor (TF), and Bioaccumulation Coefficient were determined. These plants were grown in their native habitats (BAC). We have analysed, cadmium concentration from soil which are collected from 50 different locations ranged from 11.54 mg/Kg (the lowest) to 89.80 mg/Kg (highest). The maximum concentration (89.80 mg/Kg) of cadmium was found in HIE-ST-16L Marble City and HIE-ST-7 Bryon Pharma (88.51 mg/Kg) while its minimum concentration (12.47 mg/Kg) were detected in the soil of Site (HIE-ST-14L Royal PVC Pipe) and (11.54 mg/Kg) at the site (HIE-ST-11 Aries Pharma). Most plant species showed huge potential for plant based approaches like phyto-extraction and phytoremediation. They also showed the potential for phyto-stabilization as well. Based on the concentration of cadmium the most efficient plants for phytoextraction were Cnicus benedictus, Parthenium hysterophorus, Verbesina encelioides, Conyza canadensis, Xanthium strumarium, Chenopodium album, Amaranthus viridis, Chenopodiastrum murale, Prosopis juliflora, Convolvulus arvensis, Stellaria media, Arenaria serpyllifolia, Cerastium dichotomum, Chrozophora tinctoria, Mirabilis jalapa, Medicago polymorpha, Lathyrus aphaca, Dalbergia sissoo, Melilotus indicus and Anagallis arvensis. The cadmium heavy metals in the examined soil were effectively removed by these plant species. Cerastium dichotomum, and Chenopodium murale were reported to be effective in phyto-stabilizing Cd based on concentrations of selected metals in roots and BCFs, TFs, and BACs values.

Resumo A seca é um dos estresses abióticos mais prejudiciais que dificultam o crescimento e o desenvolvimento das plantas. O presente estudo teve como objetivo determinar os efeitos de vários quocientes de Ca/Mg sob estresse osmótico induzido por polietilenoglicol (PEG) no crescimento, absorção e translocação de Ca e Mg em Avena sativa L. As plantas foram cultivadas em solução nutritiva suplementada com três diferentes quocientes molares de Ca/Mg (0,18, 2 e 4). Após 30 dias, as plantas foram expostas a duas concentrações diferentes de PEG (0,6 MPa e 0,2 MPa) por 8 dias, e as soluções foram renovadas após 4 dias. Uma solução contendo os nutrientes Ca e Mg mitigou o impacto negativo causado por estresse osmótico na taxa de crescimento relativo (RGR), taxa de crescimento absoluto (AGR), taxa de crescimento da cultura (CGR), razão de área foliar (LAR), razão de índice foliar (LAI), razão raiz-parte aérea (RSR), eficiência do uso da água (WUE) e taxa de assimilação líquida (NAR). Além disso, afetou negativamente os parâmetros de germinação, incluindo porcentagem final de emergência (FEP), tempo médio de germinação (MGT), índice de germinação de Timson (TGI), índice de taxa de germinação (GRI) e capacidade de campo percentual (%FC) de aveia (Avena sativa L.). O Mg e o Ca na parte aérea e raiz e o fator de translocação de Ca diminuíram com o aumento de Ca em solução, enquanto o fator de translocação de Mg aumentou com o aumento de Ca em solução nutritiva. Neste trabalho, são examinados os efeitos combinados de vários quocientes de Ca/Mg e estresse osmótico produzido por PEG em diferentes concentrações (0,6 MPa e 0,2 MPa) no crescimento e na absorção de elementos de Avena sativa L. Como resultado, o quociente de Ca/Mg pode combater naturalmente o estresse hídrico moderado experimentado pelas lavouras.

Abstract Drought is one of the most damaging abiotic stress that hinder plant growth and development. The present study aimed to determine the effects of various Ca/Mg quotients under polyethylene glycol (PEG)–induced osmotic stress on growth, uptake and translocation of Ca and Mg in Avena sativa (L). Plants were grown in nutrient solution supplemented with three different Ca/Mg molar quotients (0.18, 2, and 4). After 30 days plants were exposed to two different PEG (Polyethylene glycol) concentrations (0.6 MPa & 0.2 MPa) for 8 days, and solutions were renewed after 4 days. A solution containing Ca and Mg nutrients has mitigated the negative impact caused via osmotic stress on relative growth rate (RGR), absolute growth rate (AGR), crop growth rate (CGR), leaf area ratio (LAR), Leaf index ratio (LAI), root-shoot ratio (RSR), water use efficiency (WUE) and net assimilation rate (NAR). In addition, it adversely affected germination parameters, including final emergence percentage (FEP), mean germination time (MGT), Timson germination Index (TGI), germination rate index (GRI) and percent field capacity (%FC), of oat (Avena sativa L.). Mg and Ca in shoot and root and Ca translocation factor decreased with increasing Ca in solution, while Mg translocation factor increased with increasing Ca in nutrient solution. In this work, the combined effects of various Ca/Mg quotients and osmotic stress produced by polyethylene glycol (PEG) in different concentrations (0.6 MPa, 0.2 MPa) on the growth and element uptake of Avena sativa L. are examined. As a result, the Ca/Mg Quotient may naturally combat the moderate drought stress experienced by field crops.

Abstract The goal of this study is to review the overall prevalence, burden, and distribution of the dengue disease in Pakistan from 2000 to 2019. Literature was searched using different search engines like Google scholar, PubMed, etc. providing the keywords “Dengue disease/infection, Dengue virus, DENV, DF/DHF/ DSS Pakistan”. All the published research papers/reports on the dengue virus over the period 2000 to 2019 were studied and selected data were summarized using MS Excel for windows such as total cases, age wise, gender, DENV serotype distribution, total DHF, and DSS patients. The literature providing insufficient data was excluded. The total number of cases reported during 2000-19 were 201,269. The maximum number of cases during the mentioned literature survey period was reported in Khyber Pakhtunkhwa (KP) (23.3%) followed by Punjab (3.8%) and Sindh (1.9%). The majority of dengue-infected cases were reported as Dengue fever (74.4%) followed by DHF (24.1%) and DSS (1.5%). Overall the deaths during the mentioned literature survey were 1082, of which the maximum mortalities were reported from KP (N=248) followed by Punjab (N=220). DENV remains a major public health problem in Pakistan and seems to remain endemic for a long time. The total prevalence of dengue infection is increased accordingly with time from 2000 to 2019. Moreover, all the four serotypes exist in Pakistan with increased mortalities.

Resumo A literatura foi examinada através de diferentes mecanismos de pesquisa, como Google Acadêmico, PubMed, etc., fornecendo as palavras-chave “Dengue disease/infection, Dengue virus, DENV, DF/DHF/ DSS Pakistan”. Todos os trabalhos/relatórios de pesquisa publicados sobre o vírus da dengue no período de 2000 a 2019 foram analisados e os dados selecionados foram coletados e resumidos usando o MS Excel para janelas como total de casos, idade, sexo, distribuição de sorotipos, total de DHF e pacientes com DSS. A literatura que forneceu dados insuficientes foi excluída. O número total de casos notificados de 2000 a 2019 foi de 201.269. O número máximo de casos durante o período de levantamento da literatura mencionado foi relatado em KP (23,3%), seguido por Punjab (3,8%) e Sindh (1,9%). A maioria dos casos de infecção por dengue foi relatada como Dengue (74,4%), seguida por FHD (24,1%) e DSS (1,5%). No geral, as mortes durante a pesquisa de literatura mencionada foram 1.082, das quais as morbidades máximas foram relatadas em KP (248), seguidas por Punjab, com um total de 220 mortes. O DENV continua sendo um grande problema de saúde pública no Paquistão e é considerado endêmico agora e provavelmente permanecerá por muito tempo. A prevalência total de infecção por dengue foi aumentada conforme a pesquisa de literatura publicada entre 2000 e 2019. A mortalidade por DENV também aumentou. Todos os 4 sorotipos, bem como em várias formas, existem no Paquistão.

ABSTRACT Introduction: There is lack of papers dedicated to the laparoscopic buccal mucosa graft (BMG) ureteroplasty of the complex upper ureteral stricture. The aim of this study is to evaluate the results of laparoscopic BMG ureteroplasty in patients with complex proximal ureteral stricture. Material and methods: Twenty-four patients underwent laparoscopic ventral onlay BMG ureteroplasty for long or recurrent proximal ureteral stricture not amenable to uretero-ureteral anastomosis over 2019-2022. Patient demographics, operative time, estimated blood loss, length of stay, follow-up, intra- and postoperative complication rate and percentage of stricture-free at last visit were analyzed. Results: The mean stricture length was 3.6 cm. The mean operative time was 208.3 min, while mean blood loss was 75.8 mL. The length of hospital stay was 7.3 days. No intraoperative complications were observed. Postoperatively, seven patients developed complications (29.2%). Five patients experienced a Grade II (according to Clavien nomenclature). Two patients developed a Grade IIIa complication, which included leakage of the anastomosis site. The mean follow-up was on the 22 months with stricture free rate 87.5%. Conclusion: Patients with proximal ureteral strictures could be effectively treated by laparoscopic ventral onlay ureteroplasty with a buccal mucosa graft.